綠蜂膠具有多元的功能成份

蜂膠有天然抗生素之稱,主要含有芬多精、蜂膠多酚、類黃酮、微量元素、有機酸及多種酵素與維生素等成份對人體與植物都很有益處.

台灣綠蜂膠含有高抗氧化能力的異戊二烯類黃酮

源自於造物主的精妙的創造,植物經由吸收二氧化碳、水及陽光,合成出豐富的糖類、脂質、植化素系統與纖維素.

台灣綠蜂膠的成分具有相當高的商業應用價值

主要在於可萃取的類黃酮含量高達60%以上,對神經系統有幫助的異戊二烯類黃酮(PPL)更是含量中的主要成份.

國內外蜂膠相關研究期刊分享

蜂膠的修護功能很多元,特別是用於疾病的改善,在此我們整理並分享台灣及國外關於蜂膠的研究報告.

台灣原生綠蜂膠產品化應用

綠蜂膠富含修護功能的類黃酮很適合製作成簡易的保養品用,我們提供如蜂膠膏、蜂膠護唇膏、蜂膠乳霜…等DIY配方及做法.

2017年6月30日 星期五

蜂膠的萃取法與比較


【蜂膠的萃取方式】
依溶劑的特性可分為7種:
1.水萃取法
2.酒精萃取法
3.PEG(聚乙二醇)溶劑萃取法
4.丙二醇萃取
5.甘油萃取法
6.超臨界萃取法
7.多段式萃取法

【萃取原理與蜂膠的組成】
蜂膠80%是由蜂蠟及樹脂所構成,其中蜂蠟是油溶性物質,而樹脂是由有機酸及多酚物質聚合而成的高分子,最終會轉化為木質素,不溶於油,微溶於水中,或聚乙二醇(PEG)。
所以應當提取的成分是具功保健功能的有機酸、多酚及芳香族化合物。
芳香族化合物其中包含的物質:肉桂酸、咖啡酸、阿魏酸、苯甲酸、水楊酸和 2-氨基-3-甲氧基苯甲酸。最重要的芳族酯包括肉桂酸和咖啡酸的乙酯、苯甲酸的苯乙酯。在蜂膠中經常檢測到黃酮類化合物,如白楊素、柚金黃酮、松香素、芹菜素和松香素查爾酮。還可能發現高良薑素、山奈酚和松香素。歐洲蜂膠中存在的其他化合物(值得一提)是香葉醇、橙花醇、其他芳香族化合物(香草醛)、碳氫化合物、三萜醇、酶(澱粉酶、酯酶)。
以上這些成份主要是偏油性成份,但也帶有親水性的官能基(-OH,中文為羥基;羰基或羧基-C=O),因此依照萃取技術的理論同屬性互溶的特性,選擇溶劑進行萃取。

【酒精萃取還是超臨界萃取好?】
依據萃取的原理,基本上乙醇(CH3CH2-OH)是最好的萃取溶劑,
第二個是丙二醇(HO-CH2CH2CH2-OH),第三是二氧化碳(O=C=O)超臨界萃取
第四聚乙二醇(-O-CH2CH2-O-)萃取法,缺點雜質多、經吸收後會氧化為草酸及結石物質
第五是水萃取(H-OH)及甘油(HO-CH2-CHOH-CH2-OH),高親水性,多酚成份溶解度低
在台灣及日本普遍用酒精萃取製程生產蜂膠液,但缺點是高揮發性、酒測及孩童不適合。
在歐美地區則是使用丙二醇萃取,安全性高,缺點是製作時間長,樹脂含量高,
至於水萃的方式,孩童接受度高,但萃取效果很差只有2%以下。
 
【超臨界萃取法】
至於目前市場的蜂膠產品標榜高科技的採用,
看似可以獲得高純度的蜂膠樹脂為有效成份,
但仍需要將取得蜂膠萃取物固體物,
再溶解於丙二醇中,樹脂成份仍佔80%以上,
添加高劑量的蜂膠樹脂相對有效成份也高,
而這是最常見的商品標示。


蜂膠最新的製作方法為【多段式萃取】
縮短製程時間、去樹脂、脫蜂蠟、濃縮及酒精分離,
蜂膠裡主要的有效成份為生物類黃酮、有機酸及多酚成份。
經檢驗分析得知經由多段式萃取的蜂膠液,
固成份中有90%以上是類黃酮,
建議買蜂膠時要看標示,
標的是蜂膠樹脂含量還是類黃酮含量哦!


各國蜂膠品質的標準為何?

 蜂膠的基本組成是樹脂、蜂蠟、花粉及礦物質,經研究指出透過層析分離後可以取出單一種成分進行實驗,可以瞭解蜂膠的主要功效存在於樹脂成分中,特別是其中的類黃酮(又稱生物類黃酮)成分與多酚物,具有抗氧化能力、抗腫瘤的功能,因此國際上認定蜂膠產品與植物萃取物的保健標準時,標示類黃酮含量越高最具有保健成效。

在此列出各國蜂膠產品的標示

【台灣】與巴西與加拿大採用的方式相同
中華蜂膠協會的蜂膠液的標準
 1. 含膠量:含膠量須達10%以上
2. 類黃酮素:0.5%以上
 ★ 含量單位換算 10mg/ ml = 1.0%

【紐西蘭、澳洲】
標示 PLF30 30mg/g=3.0%
PFL (Propolis Flavonoids);
PFL 30則代表建議服每ml用量含30毫克類黃酮

【德國】藥典制定蜂膠類黃酮品質的等級
 a. 類黃酮含量 5 ~ 10mg/ml 屬於通級蜂膠
 b. 類黃酮含量10 ~ 15mg/ml 屬於良好蜂膠
 c. 類黃酮含量 15 ~ 20mg/ml 屬於優良蜂膠
d. 類黃酮含量 20mg/ml以上 屬於頂級蜂膠


台灣綠蜂膠的品質好嗎?

蜂膠所擁有的抗氧化物質實際相當多元,異戊二烯類黃酮、黃烷醇、檞皮素、白楊素、高良薑素和喬松素…、咖啡酸苯乙酯(CAPE)、異阿魏酸、咖啡酸、單寧酸…等,這些成分主要是蜜蜂所採擷的植物不同之外,在於植物的年齡及發展階段也影響著抗氧化物的產量及品質,通常樹齡高,有效成份含量較高,舉個例子:老欉的柚子比新欉甜、薑還是老的辣(薑黃素含量高)。

抗氧化物質清除自由基的效果強弱,重點在分子量高於400,結構上有多環連結、有(OH-)、多雙鍵的,可以產生共軛效應,應分子的電子傳遞有更高的自由度,並且可轉化更多的自由基,也能提升更多的抗氧化力更強,就台灣綠蜂膠所含的特有的異戊二烯類黃酮正好符合這些條件,所以抗氧化能更甚於其他國家來源的蜂膠,加上樹脂含量少,可利用率高,只是萃取技術運用得當,將是相當優質的蜂膠產品及新藥開發來源。

抗氧化力排名:
異戊二烯類黃酮>檞皮素>高良薑素>大豆異黃酮>咖啡酸苯乙酯>異阿魏酸>咖啡酸>單寧酸
經研究分析指出蜂膠中含有很多的烯萜類揮發物質,包括杜松烯、派烯、檸檬烯…等,具有祛痰、止咳、驅蟲、鎮痛、降血壓、降血脂、抗癌和提高免疫力等作用,其中現在很多癌症階段製劑物是通過提取三萜類化合物製成的。
*檞皮素與CAPE是著名的抗腫瘤細胞的成分
**阿魏酸是保養品的明星成分
***咖啡酸正是咖啡豆內的保健功能要角之一

台灣綠蜂膠可誘導人類肝癌細胞凋亡

台灣蜂膠衍生物通過誘導內質網應激和激活轉錄因子-3誘導人肝癌細胞凋亡
A Taiwanese Propolis Derivative Induces Apoptosis through Inducing Endoplasmic Reticular Stress and Activating Transcription Factor-3 in Human Hepatoma Cells

版權所有©2013Fat-Moon Suketal.這是根據知識共享署名許可分發的開放獲取文章,其中規定了無限制使用,分發和重新製作,提供了原創性功能。

激活轉錄因子(ATF-)3,一種應激誘導型轉錄因子,在各種應激條件下迅速上調,在誘導癌細胞凋亡中起重要作用.NBM-TP-007-GS-002(GS-002)是一種台灣蜂膠素propolin G(PPG)衍生物。在本研究中,我們在體外研究了人肝癌Hep3B和HepG2細胞中GS-002的抗腫瘤作用。首先,我們發現GS-02顯著抑制細胞增殖並誘導細胞凋亡的劑量依賴性。在GS-002處理的細胞中發現幾種主要的凋亡指標,例如半胱天冬酶-3,半胱天冬酶-9和聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的切割形式。 GS-002還誘導內質網(ER)激活,如通過ER激活反應蛋白包括葡萄糖調節蛋白78(GRP78),生長停滯和DNA損傷誘導基因153(GADD153),磷酸化脫氧核糖核酸因子2α(eIF2α) ),磷酸化蛋白質內質網 - 宿主激酶(PERK)和ATF-3。 ATF-3表達的誘導是由有絲分裂原激活的蛋白激酶(MAPK),信號轉導通路在COS-002處理的細胞中進行的。此外,我們發現GS-002在ATF-3表達細胞中誘導更多的癌細胞的凋亡。這些結果表明,蜂膠衍生物GS-002的凋亡誘導通過ER脅迫和ATF-3-依賴性通路部分介導,而GS-002具有作為抗腫瘤藥物發展的潛力。

Copyright©2013FatMoon Suketal.This is an open access article distributed under the Creative Commons Attribution License, which permit sunrestricteduse, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properlycited.

Activating transcription factor-(ATF-) 3, a stress-inducible transcription factor, is rapidly upregulated under various stress conditions and plays an important role in inducing cancer cell apoptosis.NBM-TP-007-GS-002(GS-002) is a Taiwanese propolin G (PPG) derivative. In this study, we examined the antitumor effects of GS-002 in human hepatoma Hep3B and HepG2 cells in vitro.First,we found that GS-02 significantly in hibited cell proliferation and induced cell apoptosis in dose-dependent manners. Several main apoptotic indicators were found in GS-002-treated cells, such as the cleaved forms of caspase-3, caspase-9, and poly(ADP-ribose) polymerase (PARP). GS-002 also induced endoplasmic reticular (ER) stress as evidenced by increases in ER stress-responsive proteins including glucose-regulated protein 78 (GRP78), growth arrest- and DNA damage-inducible gene 153 (GADD153),phosphorylate deukaryoticinitiation factor2𝛼(eIF2𝛼),phosphorylatedproteinendoplasmic-reticular-residentkinase (PERK), and ATF-3. The induction of ATF-3 expression was mediated by mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathwaysinGS-002-treatedcells.Further more,we found that GS-002 induced more cell apoptosis in ATF-3-over expressing cells. These results suggest that the induction of apoptosis by the propolis derivative,GS-002,is partially mediated through ER stress and ATF-3-dependentpathways,andGS-002 has the potential for development as an antitumor drug.

蜂膠組成分分析及抗菌特性研究

研究生: 解玉軫
論文名稱: 不同種類蜂膠之組成分分析及抗生特性研究

httphandle.ncl.edu.tw11296ndltd55030791244372636753
蜂膠是蜜蜂採自植物不同部位所產生的樹脂、膠質經其酵素作用後所形成物質,蜂膠具有廣泛之生物活性,如抗細菌、抗真菌、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化等。主要成份為類黃酮、芳香族醇、醛類、酸及其衍生之酯類、脂肪酸族及其衍生之酯類、碳氫化合物、胺基酸、醣類等。本研究選擇不同產地蜂膠分析,進行色澤分析、一般化學成份分析、游離胺基酸分析,薄層色層分析、分光光度計、高效能液相層析將主要之抗生成分定性定量。並篩選適當菌株作為其抗生特徵之應用,選擇不同溶劑系統,包括甲醇、乙醇、乙醚、氯仿,就脂溶性、醇溶性、水溶性等不同條件下萃出物,與常用抗生素、食品級防腐劑比較其抗菌性,並進一步探討其在應用上之協力作用。研究結果顯示,不同產地蜂膠其色澤有明顯差異,如台灣蜂膠為淡黃綠色,而澳洲蜂膠為紅棕色。一般化學成份以粗脂肪含量最高,介於41.63~81.12﹪平均為59.03﹪,總糖含量介於1.80~9.65﹪平均為6.65﹪居次;而蜂膠萃出物以粗脂肪含量最高,介於23.2~87.9﹪平均為42.98﹪,總糖含量介於5.84~10.18﹪平均為8.30﹪居次。就總胺基酸而言,佔蜂膠2.20~5.79﹪,除台灣綠蜂膠以天門冬胺酸及麩醯胺含量較高,其他產地蜂膠則以麩醯胺含量較高。而蜂膠萃出物總胺基酸佔0.07~0.94﹪,除台灣蜂膠以脯胺酸含量較高,其他產地蜂膠仍以麩醯胺含量較高。總類黃酮含量以中國大陸(華南)蜂膠最高佔13.02﹪,而總類黃酮中槲皮酮含量則以台灣12.02﹪最高。利用薄層色層分析,可簡易定性總類黃酮中之槲皮酮及金黃素,其Rf分別為0.37及0.65,在不同產地蜂膠均可發現此Rf值。萃出量會因產地、處理方式不同有明顯差異,以95﹪乙醇萃取蜂膠最高為62.39﹪;不同方式的水萃取最高為6.67﹪,多種溶劑萃取不同產地之蜂膠發現以氯仿萃取率最高為45.40﹪。於測試之九種細菌、三種黴菌、三種酵母菌評估蜂膠之抗菌性,不同產地蜂膠最低抑菌濃度平均顯示其抑制格蘭氏陰性菌的效果較佳,餘依次為黴菌、酵母菌、格蘭氏陽性菌,抑菌效果較好有綠膿桿菌、圓假絲酵、大腸桿菌。以不同溶劑系統萃取蜂膠發現,脂溶性萃出物抑菌效果較水溶性及醇溶性佳,蜂膠抑菌效果較食品用防腐劑佳,介於常用抗生素之間,並與抗生素有協力作用。

蜂膠萃取液之抗氧化力及對血小板凝集作用影響之研究

研究生: 簡立昇
論文名稱: 蜂膠萃取液之抗氧化力及對血小板凝集作用影響之研究 http://handle.ncl.edu.tw/11296/ndltd/94462313449943288096

減少血栓的產生並降低動脈粥狀硬化及高血壓的形成而達到預防或延緩腦心血管疾病之發生,為目前食品營養學界重要的研究課題。市售蜂膠產品因宣稱具有強之抗氧化力及抑制血小板凝集的成分,似乎可作為一種預防腦心血管疾病的機能性食品。本研究之目的乃在於嘗試建立市售蜂膠產品品質評估之標準及探討蜂膠對活體血漿總抗氧化力及血小板凝集作用之影響。本研究分為體外及活體試驗兩部分,體外試驗是以健康成人之血漿,分別添加水、乙醇及不同濃度蜂膠酊劑,於37℃培養30分鐘後分析總抗氧化狀態並測定血小板凝集反應。活體試驗一是以24隻250克之雄性Hartley天竺鼠,分為3組並餵食不同劑量蜂膠酊劑(對照組、低劑量及高劑量組)一週後,分析血漿之總抗氧化力及血小板凝集反應。活體試驗二是將20隻餵食高脂飼料之雄性SD大白鼠,分為兩組並給予酒精(對照組)及蜂膠酊劑(實驗組)兩週後,測定血漿之總抗氧化力及血小板凝集反應。活體試驗三則是以24隻雄性SD大白鼠管灌Naringenin以探討其在血漿中之代謝。
結果顯示市售蜂膠酊劑在體外實驗時確實具有相當強之抗氧化作用及抑制血小板凝集的能力,但在活體試驗一中並無顯著的影響,推測可能是蜂膠中之類黃酮物質無法被活體吸收的緣故,因此,活體試驗二乃利用油脂混合蜂膠酊劑餵食以利黃酮物質之吸收且避免被消化酵素破壞,並給予高脂肪飲食以突顯其效果,但結果仍無顯著影響,推測可能是類黃酮物質於活體中失去活性的緣故。為探究其原因,將所餵食具有最強抗氧化力之紐西蘭蜂膠,以高效液相層析儀(HPLC)進行成分分析,發現含有高量之類黃酮物質Naringenin,因此以此物質再進行活體試驗三,結果顯示Naringenin進入活體後,會迅速代謝為抗氧化力微弱之配糖體Naringin,使得蜂膠對於活體之抗氧化作用無法產生顯著之影響。而在血小板凝集反應方面,Naringenin及Naringin於體外實驗皆有相同抑制凝集之效果,但在活體實驗中則無顯著影響,其於活體代謝後失去活性之機制仍有待進一步的探討。綜合上述,蜂膠因含有高量的類黃酮物質,確實具有抗氧化及抑制血小板凝集之作用,但經活體代謝後,因形成具配糖體之類黃酮物質及一些不明的機制,而失去其抗氧化及抑制血小板凝集之效果。

台灣蜂膠之抗癌機制與促進神經幹細胞生長及分化的探討

台灣蜂膠之抗癌機制與促進神經幹細胞生長及分化的探討
http://handle.ncl.edu.tw/11296/ndltd/16138669076108245998

part 1
蜂膠乃是由工蜂採集植物之e80;芽或樹皮之汁液所得之一種膠狀黏性物質。蜜蜂將蜂膠帶回巢穴並修飾與混合其它物質,包括有蜂蠟與蜜蜂之唾液。將蜂膠萃取,發現蜂膠成分含有非常複雜組成,這可能與當地之地理環境與植物林相有密切關聯。蜂膠長久以來已廣汎在許多的地方當做民俗療法之用藥。目前已發表文獻,已經顯示蜂膠具有抗腫瘤、抗氧化、抗發炎、免役調控、抗病毒及抗菌活性。而這些藥理特性一般認為與蜂膠含有大量之類黃酮有關。目前,從蜂膠分離並鑑定之類黃酮,包括有caffeic acid、 ferulic acid、 cinnamic acid、 chlorogenic acid 及它的酯類衍生物。這其中最有名的,是由巴西蜂膠所分離之CAPE (caffeic acid phenethyl ester) 具有強效抗發炎、抗氧化及抗腫瘤活性。
許多文獻已經報導天然物(natural products) 應用於癌症之化學治療,例如taxol、adriamycin、VP16、camptothecin及 carnosol,這些化合物皆具有誘導癌細胞自我凋亡之活性。本論文研究台灣蜂膠的成分組成及生物活性,到目前為止,已有六個成分被分離鑑定,由核磁共振(NMR)光譜顯示,這些化合物的化學結構屬於prenylflavanone類。這六個化合物中,四個是新的化合物,分別命名為propolin A、propolin B、propolin E、及propolin F;另外二個已知化合物,我們稱為propolin C (nymphaeol-A)及propolin D (nymphaeol-B)。後二者雖為已知結構,但是尚未發現有相關生物活性方面的報告。
本篇論文研究台灣蜂膠之抗癌生物活性顯示,propolin C 及propolin D比CAPE擁有更強之誘導人類黑色素細胞瘤 (human melanoma cell)自我凋亡的活性,IC50 約為8.5μM。但是,這六個化合物所造成之癌細胞自我凋亡機制是相同的。Propolins是經由活化caspase-8、Bid、cytochrome c 從粒線體釋放至細胞質,再活化caspase-9、caspase3、PARP最後造成DNA之片段化;這個過程稱為粒線體有關(mitochondrial-dependent pathway)之活化機制。在抗癌方面六種propolins有不同程度的抗癌活性propolins D≧C>E>A>B>F它們的IC50分別是8.5, 8.5, 11.7, 13.6, 17.0, 35.4 μM。在抗氧化活性方面評估了這六個化合物抑制Xanthine Oxidase之活性。結果顯示propolin C、propolinE、propolin D比CAPE擁有更強的抑制活性;IC50分別為17.0 μM、17.0 μM 、22.0 μM、45.0 μM。在清除自由基方面,結果顯示propolin C、propolin A、及propolin B比CAPE擁有更強清除自由基的活性。
台灣蜂膠擁有豐富之prenylflavanones類黃酮化合物,並且顯示具有強效誘導多種癌細胞自我凋亡及抗氧化的活性。進一步比較台灣蜂膠與巴西蜂膠之多酚類(polyphenols)含量、清除自由基能力、抗癌活性及化學組成。結果顯示,台灣蜂膠含有較高量之多酚類及具有較強之自由基清除能力。在抗癌方面,台灣蜂膠擁有較強之抗癌活性,約比巴西蜂膠強十倍,最後利用HPLC分析七種台灣不同產地及四種不同巴西產地之蜂膠,結果顯示,台灣蜂膠含大量之propolin C、propolin D、及propolin F。然而,巴西蜂膠則含有豐富之CAPE。本研究結果顯示,蜂膠素propolins是台灣蜂膠所特有的成分,並足以解釋為何台灣蜂膠比巴西蜂膠擁有更強的抗癌及抗氧化活性。
part 2
治療神經退化性疾病是挽救受損的神經細胞並且刺激神經再生較理想之策略。神經幹細胞不僅存在於發育中的哺乳類神經系統,同時亦存在成年的哺乳類器官中,包括人類。神經幹細胞可以由胚胎幹細胞衍生。然而,調控內生性之神經幹細胞之機制,還不是非常清楚。目前已經開始使用神經幹細胞來修補受損之細胞,並且活化內生性神經幹細胞來提供“自我更新”。對於神經幹細胞,我們已有初步的瞭解。然而,我們必須能夠控制它們的增生或者分化為各種子代細胞。許多的報告顯示,神經幹細胞在哺乳類中樞神經系統發育至成熟過程中被發現,這些細胞可以被分離,並且放大數量在有生長因子的培養條件下,而這些因子目前已知包括有bFGF及EGF。假若將這些生長因子去除,再適量補充一些物質或者其它生長因子或親神經性因子,神經幹細胞會分化為neurons, astrocytes及oligodendrocytes。 許多的親神經性因子已被發現,包括有GDNF,BDNF,NGF, NT3, NT4, PDGF,這些因子都是非常有活性促進神經細胞存活。然而它們在臨床使用上受到許多的限制,原因是投予這些因子時不易到達腦部,然而,假若有一些小分子化合物能夠活化內生性神經幹細胞,促進細胞的增生或分化或者加強親神經性因子之訊息傳遞,或許可以提供另外一種預防退化性神經疾病或治療的策略。
在這篇論文,我們評估propolin A,propolin B,及propolin C可否促進腦皮質神經細胞的存活,或者影響神經幹細胞的形成,或者分化的命運。結果顯示,propolin A及propolin B在低密度神經細胞培養條件下,明顯抑制神經細胞的死亡,增加細胞的存活。在神經幹細胞的形成方面,結果顯示propolin A比 bFGF或EGF更明顯地會促進神經球的形成,並且維持這種球狀特性。訊息傳遞的研究顯示,造成這個原因可能是propolin A及propolinB 促進幹細胞磷酸化AKT及ERK,並且增加Trk-B蛋白表現。更進一步,我們評估propolin A 是否可以影響神經幹細胞分化為神經細胞,結果顯示propolin A 比bFGF或者EGF更有能力誘導。 在神經保護方面,propolin A明顯的保護腦皮質神經細胞免於rotenone或過氧化氫攻擊所造成的死亡。所有的這些結果顯示propolin A可能具有親神經性因子活性。
茶是世界上受歡迎的飲料之一,它具有美好的滋味及濃郁的芳香,近幾年很多報導都認為對身體之健康有益。並使用毛細管電泳分析新鮮茶葉及烏龍茶的theanine、caffeine、及catechins,我們評估這些茶湯對神經幹細胞分化活性之影響,結果顯示未處理之幹細胞能夠貼附於培養皿底部,並且促進神經幹細胞分化,可觀察到神經纖維往外生長。然而,處理茶湯之細胞則無法貼附培養皿底部,抑制了神經幹細胞分化。為了探討何種茶成分能夠擁有這個作用,我們進一步處理0到50μg/mL之EGCg,發現在20μg/mL就能明顯抑制細胞分化,然而,當我們使用高劑量的caffeine (50μg/mL)及theanine (348μg/mL),發現這二個化合物並不會抑制神經幹細胞分化。這個結果暗示EGCg可能影響神經幹細胞分化,並且在濃度約20-30μg/mL可能有部份細胞毒性。
總結來看,我們認為台灣蜂膠之多酚類,尤其是propolin A,可以有效促進神經幹細胞存活,並且可以誘導神經幹細胞分化為神經細胞,但茶多酚,特別是EGCg,可能有部份細胞毒性,並且影響神經幹細胞的分化命運。

台灣綠蜂膠對大鼠肝臟星狀細胞株抗纖維化之研究

探討台灣綠蜂膠及其純化物蜂膠素G對大鼠肝臟星狀細胞株抗纖維化之研究
http://handle.ncl.edu.tw/11296/ndltd/03955344252448528413

近年來慢性肝病及肝硬化排名我國十大死亡原因之一;在患有肝疾病之患者不論一開始的肝損傷原因為何,肝纖維化是大部分慢性肝病所共有的特徵。在肝臟中,肝星狀細胞 (hepatic stellate cells, HSCs) 的活化是產生肝纖維化的主要原因,隨肝臟損傷程度增加,α-平滑肌肌動蛋白 (α-smooth muscle actin, α-SMA) 的表現也會上升進而導致胞外基質 (extracellular matrix, ECM) 過度沉積,朝向纖維化的現象發生。目前許多研究致力於尋找出能治療或改善肝纖維化的藥物。而蜂膠是非常受歡迎的保健產品,早在三千多年前就有人類將之作為天然醫療用的記載,近年來的研究證實,蜂膠具有抗氧化、抗腫瘤、抗發炎以及保肝的功能。本實驗所使用的蜂膠素 G (propolin G) 是從台灣綠蜂膠 (Taiwanese green propolis) 萃取物所分離出來,屬於異戊二烯類黃酮,目前已知具有神經保護以及抗癌之功效。本實驗藉由 TGF-β1 刺激活化大鼠肝臟星狀細胞株 HSC-T6,以台灣綠蜂膠萃取物或蜂膠素 G 處理細胞探討其對細胞的影響。結果顯示,以 TGF-β1 1.5 ng/ml 可明顯提高 α-SMA 蛋白表現;隨著台灣綠蜂膠萃取物或蜂膠素 G 的濃度越高,細胞生長情形明顯被抑制;並且在西方墨點分析 α-SMA、膠原蛋白 (collagen) 有降低的現象;凋亡相關蛋白結果顯示,隨著台灣綠蜂膠萃取物或蜂膠素 G 的濃度越高 cleaved caspase 3、cleaved caspase 7 表現也越明顯,顯示細胞有可能是透過細胞凋亡的方式抑制其細胞生長;在處理台灣綠蜂膠萃取物或蜂膠素 G 1 小時後,磷酸化 JNK 有提高並且 Smad2/3 下降之情形;綜合實驗結果,台灣綠蜂膠萃取物或蜂膠素 G 可藉由抑制細胞生長,並且活化細胞走向凋亡而降低肝臟纖維化之現象。

2017年6月29日 星期四

台灣綠蜂膠對誘導仿糖尿病高血糖大鼠血糖的影響與機制

研究論文出處
http://handle.ncl.edu.tw/11296/ndltd/02726937018541840953

許多研究指出,高血糖伴隨著許多疾病的產生,了解其中的相互關係能更加幫助預防疾病。先前研究發現,綠蜂膠具有抗氧化、抗發炎及調節血脂之特性,因此本研究目的為探討補充台灣綠蜂膠對STZ 誘導仿糖尿病高血糖大鼠血糖的影響與機制。本實驗將八周齡 SD 大鼠隨機分成控制組( Control; C ),正向控制組( TZD; T ),負向控制組( DM ),一倍劑量組( DM + 1X Propolis, 183.9 mg / kg ),二倍劑量組( DM + 2X Propolis, 367.8 mg / kg ),五倍劑量組( DM + 5X propolis, 919.5 mg / kg ),連續餵食八週。期間分別檢測大鼠體重、攝食量、飲水量、空腹血糖( FBG )、空腹胰島素值、口服葡萄糖耐受試驗 ( OGTT ) 、血液生化值等。八週後動物犧牲分別檢測胰臟 β cell mass、抗氧化酵素分泌量、發炎因子分泌量及肝臟和脂肪組織中的基因表現。結果發現, FBG、空腹胰島素值、 HOMA - IR、OGTT 中的血糖變化曲線,補充綠蜂膠的組別皆顯著低於 DM 組 ; 總膽固醇( TC )、總三酸甘油酯( TG )、氧化指標( TBARS )、發炎激素( TNF - α、IL - 1β、IL - 6 )、脂肪酸合成相關基因( SREBP - 1、FAS、ChREBP、PPAR - γ)mRNA 表現量,補充綠蜂膠的組別皆顯著低於DM 組,而脂肪酸代謝相關基因( PPAR – α ) mRNA 表現量,補充綠蜂膠的組別則高於 DM 組,且與胰島素敏感性相關基因 ( Leptin, adiponectin ) mRNA 表現量、胰臟 β cell mass與 DM 組相比皆顯著增加,由以上結果得知每日補充綠蜂膠能有效地改善仿糖尿病高血糖大鼠體內的發炎情況、氧化壓力、減少胰臟 β cell 的損傷及改善能量代謝相關基因,進而穩定STZ 誘導仿糖尿病高血糖大鼠血糖的能力。

2017年6月28日 星期三

蜜蜂生態簡介


蜜蜂的產物在存數千萬年,所衍生的商品是最符合天然、環保的綠色商品, 蜜蜂是一種社會性昆蟲,與螞蟻、白蟻一樣,單獨的個體無法生存,必須以群體的方式過生活。蜂群就像一隻隻個體共同所組成的有機體,個體之間分工嚴密,各司其職,維持整個蜂群的生命力。



蜂群中分三個階級,包括蜂王一隻,數百隻雄蜂及數萬隻的工蜂。蜂王與工蜂為雌性個體,由受精卵發育而成,而雄蜂則為雄性的個體,是由未受精卵發育而成,所以蜜蜂是以女性為主的社會群體。  蜜蜂整個發育過程分為四個階段,分別為卵期、幼蟲期、蛹期及成蟲期。三個階級不但發育時間各有不同,在蜂群中的生活史與職責也各有不同之處,








蜂巢是蜜蜂的家,由一至數片的巢脾排列組成。巢脾之結構是由許多六角形的蜂房所組成,是由工蜂腹部的蠟腺所分泌之蜂蠟所建構而成。這些蜂房除供為各個階級幼蟲的發育場所外,還可作為貯存蜂蜜及花粉等蜜蜂的食物,蜂群儲存足夠的糧食才可維持正常運作。



工蜂成蜂的壽命約45~60天左右,這數十天之內,工蜂必須做完所有內內外外的工作,可說是非常的辛勞。雖然蜂巢內外的工作繁多複雜,不過工蜂可都是按部就班,由巢內工作進而巢外工作,一步步井然有序的負責完成。工蜂成蟲後1~14天主要擔任巢內工作,可稱之為『內勤蜂』,而15~25多從事野外採集工作,又可稱為『外勤蜂』,生命的最後期幾天則為守衛。



內勤蜂所擔任之工作非常多樣,包括清潔巢房,以供蜂王產卵或貯存食物之用;擔任飼育幼蟲之工作,此時工蜂頭部內有個稱為下咽頭腺及大顎的腺體,會分泌蜂王乳,餵飼蜂群內各個階級的幼蟲,此階段專門負責飼育幼蟲之工蜂又稱為『育幼蜂』。年齡稍大的內勤蜂開始從事巢內較費力的工作,諸如清潔蜂箱、搬運死蜂、清除廢物出巢,裝卸花粉、釀製花蜜等,並開始利用身體蠟腺所分泌的蜂蠟,建造或修補蜂巢。在內勤蜂還可擔任守衛工作,抵抗敵害或別群蜂之入侵。當內勤蜂會準備轉換從事戶外的工作時,內勤蜂會開始進行試飛的行為,即是離開蜂巢,在蜂巢巢口前方空中作短時間飛行,以熟悉蜂巢週遭的環境。
外勤蜂工作則為巢外採集。每日飛行於花叢與巢箱間,從植物上吸取花蜜、花粉,或從水源處取水回巢,以供應巢中所需之食物。再百花盛開,天氣良好的季節,外勤工蜂平均一天飛出去工作高達10次以上,如此高的勞動力,令人驚訝。壽命將盡的老工蜂,身體機能老化,連花粉及花蜜都無法採集回巢,甚至不能飛回巢內,便無聲無息的老死在巢外,回歸大地,結束辛勤的一生。

蜜蜂可延伸的產物
蜂王乳:含有癸烯酸,具紓敏及維護細胞健康的作用
蜂蠟:天然的乳化劑,具有保濕及抗菌的功能
蜂蜜:天然的保濕成份,具有紓緩及抗氧化的作用
蜂花粉:天然綜合維他命,微量元素鋅硒銅鎂必需胺基酸含量不亞於人工補充品
蜂膠:含有類黃酮,可抗自由基、抗氧化及維護細胞健康
蜂毒:具活化免疫力、止痛功能、活化肌膚功能
雄蜂子:含有比蜂王乳更豐富癸烯酸,保健的作用

什麼是綠蜂膠?

蜂膠的分類,主要是從外觀來判別,而分為紅膠、黃膠、黑膠及綠蜂膠,所呈現的顏色主要是因為蜜蜂在不同樹種上採集樹木的汁液、芽苞的膠質,在經過口器處理後置於後腿的【花粉籃】,而帶回蜂巢中,所以蜂膠會因為產地樹種不同,顏色與有效成分也會有所差別。

簡單的說綠蜂膠就是,通常在夏季秋初,植物生長快速含有大量的類黃酮,採收的蜂膠為黃綠色,樹脂含量少,而秋未冬季植物生長慢轉化率高,會將類黃酮生化合成為樹脂,因此樹脂含量高,所以採收的蜂膠顏色也會較深,大多為黑褐色。


因此蜂膠原塊的顏色只作分類,外觀顏色深不代表有效成分濃度高,而製作成產品時顏色深,或許只是樹脂的顏色,但現行研究報告指出綠蜂膠的類黃酮含量是最高的。

關於蜂膠的品質與應用的價值,國際上的【蜂膠評定方式】,主要在於蜂膠內所含的類黃酮含量為主,台灣綠蜂膠萃取出的類黃酮可達到55~65%,相較於巴西綠蜂膠則有18%左右。而黑膠的類黃酮含量普遍較少,可以的原因在於【類黃酮】屬於植化素二級產物的其中一種,會生合成轉化成高分子的第三級產物【樹脂】,這代表的是該族群的蜜蜂所採集的樹木轉化功能較好,只是樹脂不具有保健功能,它的存在再於轉化成第四級產物為【木質素】。

p.s.疑~那一級產物是什麼呢?答案是【異戊二烯】


2017年6月26日 星期一

蜜蜂與花粉及免破壁測試





1. 蜜蜂與植物的關係
蜜蜂與植物有密不可分的依存性,蜜蜂協助植物授粉
花粉是整棵植物的承傳基因及完整的生命精華
它是蜜蜂蛋白質唯一來源也是基礎營養源
蜜蜂將花粉放於後腿(1次2個)帶回蜂巢內儲存
年青的蜜蜂食用花粉後可轉化成蜂王乳



2. 花粉的營養分
它擁有450種以上人體必需的微量元素及營養源
含有豐富的類黃酮、異黃
酮、游離型的必需胺基酸、
維生素A、B、C、D、E、K植物固醇、卵磷脂
而這此營養素人體都可以吸收運用,具有抗氧化功能
花粉的來源多種營養素更多元

埔鹽花粉味道香甜、入口即化
茶花粉味道濃郁、質地硬而扎實
油菜花粉顏色黃綠,甜而帶酸味

3.蜂花粉需要破壁處理嗎?
其實不用,花粉孢子殼有【萌發孔】會遇水澎脹
在水或弱酸環境下會破殼分解釋出營養分
花粉的營養成份大多是水溶性人體很容易吸收
特別是天然的微量元素鋅、硒、鈣、維生素B群
豐富的酵素及必需的胺基酸都是人體不可或許的
花粉破殼釋出β-胡蘿蔔素、卵磷脂等脂溶性成份
油性脂質比水輕因此會往上浮,屬正常現象



4.適用對向
花粉的適用對象,天然食品1~99歲皆可服用
【幼童期】  成長快速所需大量營養素的補充
【青春期】 第二成長期所需之生長因子與輔助調節
【懷孕期】 母親營養補充及胎兒成長需葉酸與微量元素
【上班族】 體力及腦力消耗之能量補充
【長青族】 抗氧化物、酵素及必需胺基酸之補給
【職業運動員】  提供耐力、肌力訓練之營養源


5. 建議用量
每匙約2.5克,
成人每日5~15 克,可分2至3次食用

1. 直接食用,含在口中自然溶化

2. 加入溫豆漿、溫牛奶中(適合幼童)

3. 用入溫開水中攪拌後即可飲用

備註:水溫勿超過50℃,避免酵素及維生素的功能被高溫所破壞


2017年6月16日 星期五

台灣綠蜂膠有效成分比加拿大蜂膠高11倍




初步要看蜂膠原塊與成品的顏色,產品的外觀顏色深不代表有效成分濃度高,這只是用來做分類,從外觀色可分為紅膠、黃膠、黑膠及綠蜂膠,但製作成產品後外觀的顏色與有效成分含量的並不容易判別,顏色深不代表我們所要的類黃酮含量高,或許只是樹脂的顏色。




實際上蜂膠產品的含有豐富的生物類黃酮是,在強鹼的環境下會呈現紅色,通常檢驗的樣品交給檢驗公司使用儀器分析檢驗的,檢驗費用大約30006000元左右,測定方式透過氫氧化鈉水溶液實驗,觀察標準是顏色越紅越深,表示類黃酮含量越高,呈現的顏色經過分光光度計測定比對含量,因此檢驗公司會用儀器設備,經過分光光度計測定後的數據標準。


台灣綠蜂膠選購、檢驗方法與巴西蜂膠比較

蜂膠這個名詞,在大眾的心中蜂膠對於免疫、抗過敏、改善喉嚨不適、神經系統、皮膚問題的修修等都很有幫助,然而林林種種的產品,您選對蜂膠看懂產品標示了嗎?除了看~產地、萃取技術之外,不管水萃、甘油萃取、丙二醇萃取,超臨界也好、酒精萃取也好,實際上選蜂膠最重要的是成品的有效成分【類黃酮】含量有多少,如果買到樹脂含量高,即使價格便宜,多吃也沒什麼幫助,選對1瓶的總價值比選錯10瓶來划算,另外你或許不知道台灣也有生產蜂膠,而且品質優異。
圖一. 蜂膠圖片三色蜂膠



【篩選優質蜂膠步驟與提醒】
1. 萃取方式:蜂膠80%是由蜂蠟及樹脂所構成,所以是偏油性,所以酒精萃取是最直接,而台灣及日本普遍用此種方式製程生產蜂膠液。如果為水萃必需再添加乳化劑。至於目前市場的蜂膠產品標榜高科技的採用超臨界萃取法,看似可以獲得高純度的蜂膠有效成份,但仍需要將取得蜂膠萃取物固體物,再溶解於丙二醇中,這是最常見的商品,更新的製作方法為多段式萃取,可去樹脂、蜂蠟及酒精,並取得蜂膠裡主要的有效成分生物類黃酮。
圖二萃取方式比較


2. 蜂膠萃取物含量: 一般市售所標示的蜂膠萃取物含量高,相對的有效成份含量也會比較高,但需注意【蜂膠樹脂(Propolis resin)不等於(類黃酮)】,因樹脂是高分子物質,並不具有營養功能,所以標示出類黃酮含量才是關鍵 ,一般市售所指名的功能成分中,一般認定類黃酮含量為60mg/ml(相當於6%)是高級的產品。舉例來說某產品含量標示為40%,指的是含蜂膠400mg/ml(類黃酮含量12%),表示產品中實際類黃酮含量是4.8%,其餘35.2%的固成分,有一半以上就有可能是樹脂,所以要使用到精純的有效成分能提供檢驗認證會更好。
圖三. 營養標示範本


3. 類黃酮含量百分比【濃度】: 蜂膠的含量越高相對有效成分高,但是前提是需要去除掉樹脂及蜂蠟,因這佔蜂膠原塊的50~65%,如果吃了是樹脂沒什麼成效,且無法被人體吸收與運用,此外從蜂膠中萃取的類黃酮含量從15~65%不等,主要是依蜜蜂的產地與樹種不同,根據因外期刊研究比對資料中顯示,屬於太平洋系的台灣綠蜂膠及沖繩蜂膠,原膠塊中55~65%的都是類黃酮成分,並且含特有的異戊二烯類黃酮,不僅具有抗氧化、抗菌、抗菌毒、抗腫瘤、修護細胞,對於神經系統有幫助。這表示如果萃取方法正確即使是原膠只有10%也能提取出4.5~6.0%的類黃酮,使用效益非常高。


4. 比【顏色】: 初步要看蜂膠原塊與成品的顏色,產品的外觀顏色深不代表有效成分濃度高,這只是用來做分類,從外觀色可分為紅膠、黃膠、黑膠及綠蜂膠,但製作成產品後外觀的顏色與有效成分含量的並不容易判別,顏色深不代表我們所要的類黃酮含量高,或許只是樹脂的顏色。
實際上蜂膠產品的類黃酮是需要儀器分析檢驗的,檢驗費用大約3000~6000元左右,透過氫氧化鈉水溶液實驗,觀察標準是顏色越紅類黃酮含量越高,呈現的顏色經過分光光度計測定比對含量,因此檢驗公司會用儀器設備,經過分光光度計測定後的數據標準,如此才符合科學檢驗規範。

檢驗短片


綠蜂膠-三國類黃酮含量比較測試

檢驗蜂膠常用的8種方法